RNA pull down 是一種研究RNA與蛋白結(jié)合互作的實驗技術(shù)方法,生物體內(nèi)許多功能的核心是RNA與蛋白的結(jié)合來進行調(diào)控,如:蛋白的合成,mRNA的組裝,細胞發(fā)育調(diào)控等?;驹硎牵和ㄟ^體外轉(zhuǎn)錄獲取標記的RNA作為探針,與細胞細胞裂解液孵育,免疫共沉淀的方法獲取RNA結(jié)合捕獲的蛋白,后續(xù)可通過WB檢測驗證結(jié)合蛋白,或通過質(zhì)譜(MS)的方法得到結(jié)合蛋白的信息
技術(shù)原理:
技術(shù)服務(wù)流程:
1.克隆載體的構(gòu)建
2.體外轉(zhuǎn)錄形成標記的RNA探針
3.探針與裂解液孵育結(jié)合,形成磁珠-RNA-蛋白復合物
4.純化獲取蛋白產(chǎn)物
5.WB檢測或MS分析
服務(wù)優(yōu)勢:
1.生物信息學預測,分析RNA motif與蛋白的結(jié)合,可通過截斷與截短的方式研究結(jié)合的序列信息,為客戶提供深度分析和研究方案
2.設(shè)置完整組別,包括Input組,正義鏈組,反義鏈組,陰性組,實驗更加嚴謹可靠
3.提供可直接用于文章的標準結(jié)果圖,以及實驗原圖結(jié)果
4.提供完善的實驗報告,更利于文章的撰寫和申請
適用研究:
各種通路,代謝路徑,分子機制,細胞調(diào)控,藥物誘導等方向的調(diào)控研究,尋找或驗證RNA結(jié)合的蛋白,如:結(jié)合蛋白為某些轉(zhuǎn)錄因子,代謝過程中的核心酶,通路中的調(diào)控蛋白等
客戶提供:
1.基因信息及轉(zhuǎn)錄本信息(或含目的基因的載體)
2.活細胞:3-4*10^7
3.新鮮組織:組織量>0.3-0.5g
4.產(chǎn)物WB檢測的抗體(>5-10ug)
輝園苑提供:
1.體外轉(zhuǎn)錄檢測圖,產(chǎn)物銀染膠圖
2.完整實驗報告
3.可直接用于文章使用的處理結(jié)果圖